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>更新时间：2017-01-17 09:56:14 |
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| 简 介 |
考点梳理
（一）DNA重组技术的基本工具
1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。
（3）切割方式：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。
2．DNA连接酶——“分子缝合针”
（1）DNA连接酶的分类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。
（2）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。
3．运载体（运输工具）：质粒 、噬菌体和动、植物病毒等
（1）必备的条件：
① 能在受体细胞中复制并稳定保存；
② 具有一至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入；
③ 具有标记基因，供重组 DNA的鉴定和选择；
④ 对受体细胞无害，不会影响受体细胞正常的生命活动。
（2）常用运载体——质粒：裸露的，结构简单且独立于细菌DNA之外的，具有自我复制能力的小型环状DNA分子。
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