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>更新时间:2009-08-28 13:10:27 |
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简 介 |
【复习目标】 1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 2.尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 【复习重点与难点】 复习重点:制备固定化酵母细胞。 复习难点:制备固定化酵母细胞 知识回顾 一、实验原理 1.使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反 应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。 2.固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说,酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定,而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。 二、实验步骤 1。细胞的活化 称取lg干酵母,放入50 mL的小烧杯中,加人蒸馏水10 mL,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右,使其活化。 【注】活化:让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态 2。配制物质的量浓度为0.05mo1/L的CaCl2溶液 称取无水CaCl2 0.83g。放人200mL的烧杯中,加入150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用。 3。配制海藻酸钠溶液 称取0.7g海藻酸钠,放入50mL小烧杯中。加人10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10 mL。注意,加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。 |
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